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>Revistas >Bioquimia >Año2002, No. 4


Antonio Melchor-Rodríguez, Vivian Alonso-Ramos, Raquel López-Cisnero,Orlando Zulueta-Rodríguez1, Carlos Martínez-Ortiz, Hernández-Pérez L, Gómez-Cordero I, López-Brauet L
Obtención de las cadenas pesadas de la IgG humana para la preparación de un inmunosuero específico para su uso en el inmunodiagnóstico
Bioquimia 2002; 27 (4)

Idioma: Español
Referencias bibliográficas: 24
Paginas: 107-111
Archivo PDF: 192.37 Kb.

[Texto completo - PDF]

RESUMEN

Se describe un método para la purificación de las cadenas pesadas de inmuglobulina G humana (IgG) a partir de una mezcla de sueros humanos normales. La IgG se purificó por precipitación con sulfato de amonio y cromatografía de intercambio iónico en DEAE-Sephacel. La preparación purificada fue homogénea por electroforesis en gel de poliacrilamida en presencia de dodecilsulfato de sodio (SDS-PAGE) e inmunoelectroforesis. El recobrado final de purificación de la IgG fue de 68.78 % y un factor de purificación de 4.01. Las cadenas gamma se obtuvieron por reducción con ditiotreitol y alquilación con yodoacetamida de la IgG. La separación de las cadenas pesadas y ligeras se realizó por filtración en gel en Sephacryl S-100 en dos columnas conectadas en serie. La preparación obtenida fue homogénea por inmunodifusión doble y SDS-PAGE. El peso molecular relativo de las cadenas pesadas fue de 58.5 kDa. El rendimiento obtenido fue de 0.603 mg de cadenas pesadas/mg de IgG.


Palabras clave: IgG humana, separación de las cadenas pesadas y ligeras de la IgG, inmunoglobulina, inmunoensayo, fraccionamient.


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